叶绿素测定仪的原理特点
产品简介: ,通过测定叶绿素含量来分析植物长势,植物叶片中的叶绿素含量指示了植物本身的状况。所以叶绿素测定仪在所有植物生理仪器中有着主体地位,是一种很重要的植物生理仪器。 叶绿素测定仪根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。 根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=α
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,通过测定叶绿素含量来分析植物长势,植物叶片中的叶绿素含量指示了植物本身的状况。所以叶绿素测定仪在所有植物生理仪器中有着主体地位,是一种很重要的植物生理仪器。
叶绿素测定仪根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。
根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。由于各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。
要测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的Zda吸收峰。
叶绿素测定仪经过测量叶片在两种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量,也就是在叶绿素选择吸收特定波长光的两个波长区域,根据叶片透射光的量来计算测量值。
叶绿素测定仪来进行对植物叶片中的叶绿素含量,具有快速、无破坏的测量,测量的结果受一定的因素影响,同时也具有一定的局限性,叶绿素测定仪只能用于叶片稍大的物种,尚不能用于小叶片的,如针叶树种。
叶绿素测定仪使用中要注意的是,由于其测定的范围较小,而且反应非常敏感,如果要代表整个叶片的绿色度水平,就要对叶片的不一样的部位分别测量然后取其平均值。
叶绿素含量的测定除了能通过使用叶绿素测定仪进行测定之外,还能够最终靠使用研磨法、浸提法进行测定分析,这三种方法是如何进行测定植物叶片叶绿素含量的呢?
叶绿素含量仪:使用叶绿素含量仪测定Z为简单快速,只需要将待测的叶片放在一起上面按下按键既可得出相应的测定结果,不过叶绿素含量仪只能测定植物叶片叶绿素含量,对于水分中等其他地方的测定则是无法进行测定分析。
研磨法:首先是要进行对叶片进行研磨,以此来提取叶片中的叶绿素含量,接着将研磨好的叶绿素提取液用滤纸过滤洗涤,定容到25ml的容量瓶中。进行光谱分析。在该方法的测定过程中研磨方法对于植物叶绿素含量存在一定的影响。
浸提法:首先选择Z有代表性的叶片,将其剪成宽度小于2mm的细丝或者是小块,将这些放入盛有提取液的容量瓶中封口,至于黑暗中直接浸提,接着用紫外可见分光光度计测量。不过浸提法的测定时间需要比较久一些,而且不同浸提液测定的值也存在比较大的差异性,其中乙醇丙酮为提取液的精度较高。
在众多测定方法中,利用叶绿素仪进行测定不论是从时间还是精度上都要高于其他两种的测定方法。
在植物的种植和研究中,叶绿素含量是一个很重要的参数,可以比较准确的反映出植物的生长发育状况。其中能够准确测量叶绿素含量的叶绿素测定仪、叶绿素荧光仪等得到普遍的推广应用,那么叶绿素测定仪与叶绿素荧光仪有什么区别呢?
叶绿素测定仪是利用叶绿素对红光的特殊吸收特性,利用光电传感器对红光吸收量多少的测定,叶绿素测定仪的测量是在某一时,某一点上的瞬时测量。叶绿素荧光仪是利用叶绿素特有的荧光现象,采用极高灵敏度和反应速度的传感器,辅以光电脉冲设计来捕获电子传递过程中的各时段上的荧光数据。荧光测量是一个过程的测量。
当选择叶绿素荧光仪时,主要是研究光合作用的机理问题,而叶绿素测定仪主要是用于检测植物生长过程中的营养状况,为作物施肥提供生产上的参考。总的来说就是,叶绿素荧光仪用于理论研究,而叶绿素测定仪用于应用上的研究。
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